Набор реагентов для количественного определения антител к нейрональным антигенам (антигены: Hu, Ri, Yo) методом иммуноблота
Назначение: набор предназначен для качественного определения антител к нейрональным антигенам Hu, Ri, Yo в образцах человеческой сыворотки методом Western-блота. Приложения теста: аутоиммунные заболевания ЦНС рассматриваются как паранеопластические неврологические заболевания, возникающие в результате противоопухолевого ответа иммунной системы. К этим заболеваниям относят паранеопластический энцефаломиелит (PE), сенсорную нейропатию (PSN), прогрессирующую дегенерацию мозжечка (PCD), паранеопластическую миоклонию и атаксию (POMA и синдром мышечной скованности. Клинические проявления включают потерю памяти, чувствительности, дисфункцию мозгового ствола, мозжечковую, моторную или вегетативную дисфункцию (PE или PSN); непроизвольные судорожные движения глаза, миоклонию и атаксию (POMA). Надежная диагностика таких состояний – достаточно трудная задача. В большинстве случаев, к сожалению, опухоль, являющаяся причиной развития паранеопластического синдрома, не выявляется к тому моменту, когда у пациента наблюдаются неврологические симптомы. Паранеопластические расстройства характеризуются присутствием нейрональных аутоантител в сыворотке пациентов. Выявление таких антител полезно для клинициста, т.к. подтверждает присутствие основной опухоли. Паранеопластические неврологические заболевания могут развиться при мелкоклеточном раке легкого, нейробластоме, раке молочной железы, яичников и раке яичка. При паранеопластическом синдроме выявляются следующие аутоантитела: • анти-Hu – антитела к ядру нейрона I типа (anti-neuronal nuclear antibody, ANNA-1), ассоциированы с мелкоклеточным раком легкого, нейробластомой, реже – немелкоклеточным раком легких, раком предстательной железы, семиномой; приводят к развитию PE, сенсорной нейропатологии, автономной нейропатии. • анти-Yo – антитела к клеткам Пуркинье (PCA-1), ассоциированы с раком яичников или раком молочной железы, приводят к развитию подострой PCD, дизартрии и нистагма. • анти-Ri – антитела к ядру нейрона II типа (ANNA-2), ассоциированы с нейробластомой (у детей) и раком фаллопиевой трубы или молочной железы (взрослые), мелкоклеточным раком легких; приводит к развитию POMA, опсоклонуса, атаксии, нистагма, головокружения, дизартрии. Обнаружение таких антител подтверждает клинический диагноз паранеопластического синдрома и является основанием для целенаправленного поиска опухоли, вызвавшей развитие синдрома. Паранеопластический синдром может возникать за месяцы и годы до обнаружения вызвавшей его опухоли. Эти маркеры помогают провести дифференциальную диагностику между истинным паранеопластическим синдромом и другими воспалительными заболеваниями нервной системы, схожими с паранеопластическим синдромом. Существует строгая ассоциация между паранеопластическим синдромом, специфичностью антинейрональных антител и типом ассоциированной опухоли. Антитела против антигена Hu выявляют у 20% пациентов с раком легких, в то время как анти-Yo и анти-Ri присутствуют только у 2-4%. Однако, у небольшого количества пациентов с паранеопластическим синдромом в присутствии антинейрональных антител злокачественная опухоль не выявляется. У некоторых больных с паранеопластическим синдромом могут не выявляться антинейрональные антитела. В большинстве случаев при развитии PCD в связи с болезнью Ходжкина, немелкоклеточным раком легких, раком ЖКТ не выявляются анти-Yo антитела. Существуют анти-Yo отрицательные, атипичные аутоантитела к цитоплазме клеток Пуркинье (атипичные APCA). Такие антитела могут обнаруживаться в связи с болезнью Ходжкина, аденокарциномой легких, толстой кишки или простаты. У 5-6% пациенток при раке яичника выявляют циркулирующие анти-Yo или анти-Ri антитела в отсутствии каких-либо признаков паранеопластического неврологического синдрома. Вестерн блот иммунноанализ – высокочувствительный метод скрининга и подтверждения наличия аутоантител против разных нейрональных антигенов как ядра, так и цитоплазмы клеток зернистого слоя и клеток Пуркинье. Реакцию анти- Hu, анти-Yo и анти-Ri легко регистрировать как бэнды 35-40 кДа (Hu/ANNA-1 из экстрактов изолированных нейронов ЦНС), 62 и 34 кДа (Yo/ PCA-1 из очищенных экстрактов клеток Пуркинье) и 55 и 80 кДа (Ri/ANNA-2 из экстрактов нейрональных белков или рекомбинантный белок). Если образец не обладает иммунореактивностью на блотстрипе, результаты расцениваются как отрицательные. С использованием данного метода получены следующие результаты для пациентов, положительных на антинейрональные антитела с подтвержденной гистологически опухолью: у пациентов, позитивных на анти-Hu антитела, опухоль подтверждена у 80%, у пациентов, позитивных на анти-Yo антитела, опухоль подтверждена у 91%, у пациентов, позитивных на анти-Ri антитела, опухоль подтверждена у 57%.
